Etape 1: Concevoir une stratégie pour résoudre une situation problème (durée maximale: 10 minutes) Proposer une démarche d'investigation permettant de tester l'hypothèse qu'une glycosidase donnée catalyse de façon spécifique la réaction d'hydrolyse d'un glucide alimentaire. D'après les informations disponibles, je sais que les glycosidases sont des enzymes digestives qui catalysent l'hydrolyse des glucides, comme l'amidon, le glycogène ou le saccharose en molécules simples. Je peux donc émettre l'hypothèse suivante: Si la glycosidase catalyse de façon spécifique la réaction d'hydrolyse d'un glucide alimentaire, par exemple l'amidon, alors elle hydrolysera en sucre simple uniquement les molécules d'amidon. Pour tester cette hypothèse je propose la stratégie suivante. Je vais placer au bain marie à37° une serie de tubes contenat l'enzyme avec les glucides àtester et une série de témoins avec les glucides seuls. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction 2016. Je vais ensuite rechercher l'apparition de sucre réducteurs avec un test àla Phénylhydrazine ou àla Liqueur de Felhing (bleue) ou mieux en réalisant une chromatographie.
Si mon hypothèse est validée, alors les sucres réducteurs seront présents uniquement dans le tube avec l'amidon. Si les sucres réducteurs apparaisent dans plusieurs tubes, alors c'est que la glycosidase n'est pas spécifique. Etape 2: Mettre en œuvre un protocole de résolution pour obtenir des résultats exploitables. Tube 1 2 3 4 5 6 Substrat 1 mL amidon glycogène Saccharose Solution de glycosidase 1 mL 0 mL Eau dsitillée Les tubes sont laissés au bain marie à37°C pendant 5 minutes, on réalise ensuite une recherche de sucres réducteurs avec un test àla liqueur de Fehling. En présence d'un sucre réducteur, il se forme un précipité rouge brique. Etape 3: Présenter les résultats pour les communiquer. Tp hydrolyse enzymatique de l amidon par l amylase correction 3. Tube n° Résultat du test à la liqueur de Fehling Un précipité rouge brique se forme avec les tubes 1 et 2; il y a donc apparition d'un sucre réducteur dans les tubes n°1 avec l'amidon et n°2 avec le glycogène. Etape 4: Exploiter les résultats obtenus pour répondre au problème. L'enzyme catalyse l'hydrolyse de l'amidon et du glycogène; elle n'est donc pas spécifique.